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细胞培养中常见的『液体试剂』
点击次数：10643 发布时间：2023/3/18 20:20:20
细胞的体外培养技术，是细胞生物学的一项基本实验。了解细胞培养的目的、实验材料、实验步骤等知识，有利于培养出更健康的细胞，更好地应用于科学实验中。
本期内容，我们来探讨细胞培养过程中，常见的液体试剂。
培养基是细胞赖以生存的液体环境的提供者，人工模拟细胞在体内生长的营养环境，为细胞营养、促进细胞生长增殖的物质基础。
基础培养基是水、无机盐、碳水化合物、维生素、氨基酸等成分的混合溶液。一般情况下，会通过补加血清或是各类不同等成分，配制为适合不同细胞生长繁殖的培养基。实验中，可以通过ATCC查询所培养的细胞适合什么类型的培养基，配制比例是多少。
培养基可以是粉剂或液体，英文均为medium。
培养基有助于保持培养体系中的pH值和渗透压平衡，是控适宜细胞生长的重要且复杂的因素。
对于一些培养难度较大的细胞，选择一款能够与细胞“契合”的培养基，有利于维持细胞实验结果的稳定。另外，培养基使用的便捷程度，也是不可忽视的一个方面。
Ausbian干细胞完全培养基，是在含微量胎牛血清的基础培养基中，通过添加一种人永生化干细胞系的条件培养基混合组成，是一款即用型培养基。解冻后即可参与干细胞培养，无需二次配制，方便快捷且高效。
根据供体动物或采血时间的差异，血清分为许多种类。用于动物细胞培养的血清主要有牛血清、马血清、猪血清等。其中，牛血清的使用更为广泛，胎牛血清凭借其丰富的营养，支持多种细胞生长繁殖的特性，深受科研人员喜爱。
合格的胎牛血清，应采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血，内毒素含量也应严格控制，过高的内毒素会导致细胞提前衰老、凋亡，细胞状态变差，相应的实验结果也容易产生波动。
Ausbian进口特级胎牛血清，采自5-8月龄牛胚胎，澳洲血源，出厂前均经过严格质控，并附详细《检测报告》，内毒素含量≤3EU/ml，尽可能降低内毒素对细胞的影响，为细胞创造一个健康的生长环境，有利于实验的稳定。
在无菌的理想状态下，是没有必要添加抗生素的。但由于实验环境在实际中没要办法做到真正的无菌，所以很多科研人员会“习惯性、预防性”地添加抗生素。
但事实上，抗生素并不是「免死金牌」，真菌、支原体这些污染是它不能够对抗的，甚至滥用还会适得其反。
一些文献中表明：β-内酰胺类抗生素及氨基糖甙类抗生素，对真核细胞培养有抑制增殖作用，在原代细胞和干细胞等难养细胞上尤其明显。有研究人员发现，抗生素（双抗：青霉素和链霉素）的使用影响人体肝细胞中基因表达与基因调控。
虽然抗生素对真核细胞生长的影响机制至今尚未明确，但是为了细胞更好的生长，实验结果更加准确和稳定，在实验过程中尽量不要随意使用。实验室的环境卫生需要精心维护。
定期清洁、规范操作都是尽量避免实验污染的好方法。德国MB公司的支原体污染祛除试剂
细胞培养中，还可能会用到一些其他液体试剂。
比如用于细胞消化的胰酶，也叫细胞消化液体。常用的胰酶溶液是0.25% 、0.125％的胰蛋白酶与0.02％的二乙胺四乙酸二钠(EDTA) 调配的溶液。该消化液可以使细胞脱离粘附表面，形成单个细胞。
酚红指示剂，一种用于指示pH溶液，中性为红色，酸性为黄色，碱性为紫色。但并不是所有培养基都要添加酚红，应根据细胞种类、实验目的再决定
HEPES，细胞培养中很常见的一种Buffer；谷氨酰胺，可以作为细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。但谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应在-20 ℃冰冻保存，添加到液体培养基后，在4℃保存，不要超过1周。
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