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血清说明书——储存、解冻、使用方法
点击次数：7294 发布时间：2023/7/14 15:42:11
1、长期储存：
血清在生产制备完成后，通过质量检测，然后被运送至市场上销售。整个过程中，包括运输流程，储存温度应严格保证在-20℃，避免反复冻融影响血清活性。
实验人员在收到血清，检查完好后，及时将血清送至-20℃冰箱中储存，用时再取出采用三步法解冻。
在未解冻的情况下，血清可长期储存在在-20℃或-80℃环境中，只要是在保质期内，均能正常使用。
储存过程中，需要定期监控储存血清的冰箱中，温度是否符合规定，保证冰箱制冷效果（-20℃）是否正常，尽量避免出现温度大幅度的波动的情况，防止血清因温度变化而反复冻融的情况出现。
另外，尽量将血清独立存放于一定区域（恒温区域），避免反复开关冰箱门对储存温度造成影响。
2、在4℃冰箱中的储存：
解冻后的血清，不宜在4℃冰箱中放置过久。
血清在生产加工运输过程中，没有添加外源抗菌成分。因此开封后，如果长期保存在使用频率高且洁净度差的4℃冰箱中，很容易染菌。
如果配制为完全培养基，添加了双抗，可以在一定程度上减少培养基污染的风险，但是由于基础培养基的添加，使得整体成分更为复杂，保存不当则会使有效物质活性降低。
因此，我们建议，添加了血清的培养基尽量做到现配现用；解冻后的血清不要长期储存在4℃冰箱中，尽可能不要超过7天。
二、血清的解冻
当血清需要被解冻时，我们不建议大家把刚从-20℃中拿出的冰冻血清，直接放入4℃冰箱中过夜融化，也不要在室温进行过夜解冻。
由于血清含有蛋白质等干物质，这类物质容易先融化析出，水这类溶剂后融化，导致血清产生沉淀，影响使用效果。
因此，要尽可能保证所有成分同步融化，因此我们建议使用三步法融化，具体步骤见下表。
需要注意的是，如果血清是储存在-80℃冰箱中，三步法解冻前，应先将血清转移至-20℃冰箱中存放1-2天。
一次解冻后，分装至无菌离心管中，尽量保证每管是一次的用量，分装管解冻也遵循三步法，解冻后需全部用完。
三、血清的使用
1、血清的热灭活：
血清进行热灭活的目的是，利用较高的温度使补体失活。由于胎牛血清会严格控制采血时间为5-8月龄的胎牛，此时还未形成完整的补体系统，因此，合格的胎牛血清，是不需要灭活的。
但是实验中如果需要新生牛血清、小牛血清、猪血清或马血清这些血清时，则需要根据实验要求而定。
根据血清厂家多年来总结的经验，常规解冻后，40℃水浴加热20分钟即可，能够尽可能地保留营养成分。
2、细胞培养的应用：
对于新的细胞系或从无血清培养转变到胎牛血清培养的细胞系，需要进行适应期。在初始适应期，可以将血清浓度逐渐降低，直到细胞适应无血清培养为止。
3、关注血清的批次：
相同品牌的胎牛血清，在蛋白质含量等方面，可能会存在批次差异，因此在同一实验中使用来自同一批次的血清，以减少变异性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清，请进行验证实验以确保结果的可重复性。
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