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研究发现新疫苗可增强CAR-T，支原体检测助力科研

点击次数：7212 发布时间：2023/7/14 15:47:28

细胞治疗项目离不开支原体检测。qPCR支原体检测法（NAT法），相较于药典中传统的培养法和指示细胞法，NAT法方便快捷、准确性高、特异性强。

使用嵌合抗原受体(CAR) T细胞的过继细胞疗法(ACT)已经彻底改变了复发/难治性CD19+ B细胞急性淋巴细胞白血病和淋巴瘤的治疗。在实体瘤的情况下，尽管在解决肿瘤浸润有限、CAR - T功能差和持久性等问题方面取得了进展，但迄今为止，CAR - T治疗还不太成功。

然而，CAR - T细胞治疗肿瘤的两个关键挑战是预先存在的抗原异质性，即并非所有肿瘤细胞都表达CAR靶向的抗原，以及治疗过程中发生的抗原丢失。例如，*近的一项首次人体临床试验评估了靶向突变EGFRvIII的CAR - T细胞在胶质母细胞瘤(GBM)中的作用，结果出现了EGFRvIII肿瘤即使在*初对CD19 CAR - T治疗有反应的白血病患者中，也经常观察到CD19抗原的缺失或下调，并经常导致疾病复发抗原丢失的另一种机制是通过炎症诱导的黑素瘤去分化这些观察结果强调需要新的方法来解决抗原损失介导的肿瘤逃逸。

抗原扩散(AS)是对不同于原始治疗靶点的次级抗原的免疫反应的诱导和扩增在ACT的背景下，利用CAR - T细胞靶向一种表面表达抗原，同时诱导内源性T细胞对其他肿瘤抗原的反应，将是克服肿瘤异质性和抗原损失介导逃逸的一种有吸引力的方法。越来越多的证据表明，在癌症免疫治疗期间，AS可以引起并可能有助于整体治疗结果。例如，在接受ipilimumab治疗的患者中发现了治疗前无法检测到的肿瘤特异性T细胞的募集和扩增。

一些接受新抗原疫苗治疗的癌症患者也对共同的新抗原或癌睾丸抗原表现出AS。此外，在临床前和临床CAR - T细胞治疗的少数病例中，抗肿瘤抗体反应增加或T细胞反应减弱。尽管如此，迄今为止，CAR - T细胞疗法本身诱导具有治疗意义的AS的证据有限。临床前，大多数CAR - T研究使用免疫缺陷小鼠，根据定义排除内源性T细胞反应。在免疫能力强的小鼠模型中，CAR - T疗法本身触发AS的能力似乎有限，尤其是在实体瘤中相比之下，CAR - T细胞工程与额外的免疫反应引发分子，包括FLT3L、CD40L、 IL-12、IL-18、和IL-7/CCL或当与溶瘤病毒联合使用已被报道显示出增强的抗肿瘤活性和证据。

然而，将这些额外的效应功能引入到具有统一活性的CAR - T细胞中可能具有挑战性，并导致新的安全风险。更重要的是，无论CAR - T细胞的形态如何，在ACT过程中AS被促进的机制仍然知之甚少。

近日，研究人员在《Cell》上发表了一篇标题为：“Vaccine-boosted CAR T crosstalk with host immunity to reject tumors with antigen heterogeneity”的文章，描述了一种增强实体肿瘤中CAR - T活性的方法，即通过淋巴结中的CAR - T细胞的疫苗样增强CAR - T细胞这是通过合成与两亲性聚合物脂质尾部结合的CAR配体来完成的，在肠外注射后，CAR - T配体有效地运输到引流淋巴结(dln)，并用CAR - T配体修饰巨噬细胞和树突状细胞(DCs)的表面。CAR - T细胞在淋巴结中遇到配体修饰的树突状细胞，通过CAR与天然共刺激受体信号和来自配体呈递细胞的细胞因子刺激一起接受刺激，导致CAR - T细胞扩增和功能增强。通过给药这些“amph-配体”和疫苗佐剂来增强CAR - T细胞的疫苗，大大增强了CAR - T细胞治疗对肿瘤的排斥反应，并且出乎意料地伴随着内源性抗肿瘤T细胞反应的发展。

研究人员使用CAR - T疗法与疫苗增强相结合的方法作为模型设置，以了解as在清除抗原性异质实体瘤中的作用，并确定as的潜在机制。在多个小鼠同基因肿瘤模型中，我们发现使用第二代CAR - T细胞治疗引起的AS可以忽略不计。然而，即使在淋巴细胞耗竭(LD)预处理的情况下，疫苗增强CAR - T细胞也能显著诱导内源性T细胞启动。这一过程严重依赖于IFN-γ，通过疫苗增强或基因工程诱导的IFN-γ表达增强使CAR - T细胞能够控制具有预先存在的抗原异质性的实体肿瘤。